一、特點
效率高:具有很高的轉(zhuǎn)染效率,可以有效地將DNA或RNA轉(zhuǎn)入細胞中,從而實現(xiàn)的基因表達或基因沉默。
方便使用:使用非常方便,不需要進行復雜的操作,只需按照說明書進行即可。
安全性高:經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,具有較高的安全性,對細胞沒有明顯的毒性作用。
多種細胞類型適用:適用于多種細胞類型,可以滿足不同實驗的需求。
二、Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑的使用方法
準備細胞:將細胞在轉(zhuǎn)染前一天進行傳代,使細胞處于對數(shù)生長期。
準備DNA或RNA:將DNA或RNA進行純化,并測定其濃度和質(zhì)量。一般情況下,轉(zhuǎn)染1×10^6個細胞需要0.5-1μg的DNA或RNA。
準備轉(zhuǎn)染試劑:按照說明書要求的比例將DNA或RNA與轉(zhuǎn)染試劑混合在一起,靜置10分鐘。
轉(zhuǎn)染細胞:將DNA-轉(zhuǎn)染試劑復合物或RNA-轉(zhuǎn)染試劑復合物加入到細胞培養(yǎng)液中,輕輕搖動培養(yǎng)瓶,使復合物與細胞充分接觸。
觀察細胞狀態(tài):在轉(zhuǎn)染后的24-48小時內(nèi),觀察細胞的狀態(tài),如果細胞出現(xiàn)明顯的毒性反應,應立即停止實驗。
進行后續(xù)實驗:根據(jù)具體需要,可以在轉(zhuǎn)染后的不同時間點進行細胞免疫熒光、Western blot等實驗。
三、使用Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑的注意事項
注意安全:使用試劑時應避免將其濺到皮膚或眼睛上,以免引起不適。
注意細胞狀態(tài):在使用試劑時,應關注細胞的生長狀態(tài),如果細胞生長不良或出現(xiàn)明顯的毒性反應,應立即停止實驗。
注意操作規(guī)范:使用試劑時應按照說明書要求進行操作,避免操作不當導致實驗失敗。
注意儲存條件:試劑應儲存于低溫、干燥的環(huán)境中,避免陽光直射和高溫。